傳統的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法需要DNA變性，抗原修復，抗原抗體過夜孵育，操作步驟復雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大，嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結合，必須先進行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露，但變性的程度可能導致錯誤結果。如果變性不充分，會導致BrdU難以暴露，無法檢測，而且變性過程從邊緣向中間滲透，會導致細胞核DNA的變性不均勻，邊緣模糊不清。如果變性過分，則會導致DNA斷裂，甚至降解，導致核染不均一。另外，不同抗體試劑公司的抗體質量不一致，造成難以確保實驗重復性，且容易產生假陽性結果。上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的發展趨勢。湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調：“與傳統的免疫熒光染色不同，EdU反應能在幾分鐘內完成，且不需要進行嚴格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行。”細胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結合準確檢測新合成的DNA，簡單，快速，準確。這種檢測方法非常快速，且只需簡單的幾個步驟，因此也適用于高通量篩選試驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細胞的活力。湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價上海東寰向您介紹EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處。

按照以下的表格進行染色反應液的配制：染色反應液組分500μl1ml2ml5ml1×反應緩沖液430μl860μlmlml催化劑溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA紅色熒光溶液μlμl5μlμl緩沖添加劑50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的檢測混合液，以覆蓋細胞為宜，避光、室溫孵育30分鐘；4、棄染色反應液，加入100μlTritonX-100細胞滲透液清洗2-3次，每次10分鐘；5、棄細胞滲透液，用PBS洗兩次，每次5分鐘。DNA染色1、將Hoechst33342用RNase-free水溶液1：1000進行稀釋得到終濃度為5μg/ml的1×Hoechst染色液；2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液，室溫避光孵育20-30分鐘后，棄染色液；3、每孔加入100μlPBS洗細胞兩次，去掉洗液。圖像獲取及分析建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察；如果條件限制，請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片，可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。

注：1）培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態；2）孵育時間至少2小時，可延長至24小時后再檢測也可以。4、以1×PBS清洗細胞兩次，每次5分鐘，以除去未摻入RNA的EU殘留。注：貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。細胞的固定和通透1、每孔加入150μl細胞固定液，室溫培養30分鐘，棄固定液；注：1)該試劑盒配備了細胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來進行細胞固定；2)如果使用其他的細胞固定劑建議用DEPC水來配置，避免RNA酶降解細胞內的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘；3、棄甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；4、每孔加入300μlTritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；EU染色1、通過用10：1去離子水稀釋10×反應緩沖液進行配制1×EU反應緩沖液；2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現用現配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現棕黃色，則需報廢或更換。使用EdU細胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處？

alamarBlue®是一種快速、靈敏的細胞增殖和細胞毒性檢測試劑，適用于人、動物細胞、細菌和等多種研究對象，可用于貼壁細胞和非貼壁細胞的檢測。作為一種無毒、即用型的試劑，alamarBlue®為細胞增殖分析提供了一種簡便、快速、安全、經濟、可靠的方法。AlamarBlue®的特點與優勢●使用簡單方便：即用型的單組分試劑，只需加入培養基即可檢測細胞的增殖狀況；產生的還原產物是水溶性的，與其他常用的細胞增殖檢測方法相比，不需要固定、洗滌、提取的步驟●靈活：可通過分光光度計或熒光光度計檢測●性價比高：可用于高通量分析●安全：對細胞無毒、無害，不影響細胞代謝、細胞因子分泌、抗體合成等，對人體和環境也無毒無害●高靈敏：比較低可檢測50個細胞上海東寰告訴您如何正確使用EdU細胞增殖檢測試劑盒？湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

EdU細胞增殖檢測試劑盒的結構如何組成？湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

現在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發生——EdU檢測。EdU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷）也是一種胸腺嘧啶核苷類似物，但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見，在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中，基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比，更簡單，更快速，更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。湖北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒評價